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UV检测中容易出现检测误差的几点情况

 UV检测是利用物质对光的选择性吸收进行物质的定性或定量分析的仪器,主要用于物质纯度检查、定量分析、物质结构鉴别等。

检测流程:打开电源,检验吸收池的成套性,选择工作波长,选择测量方式,润洗比色皿,依次装入参比溶液和测量溶液,参比溶液于光路中,透射比模式下同时调0和100%;在吸光度模式下,测定测量溶液的吸光度。

可测量结果总会出现可接受或不可接受的误差,误差来源于测量过程的各个方面,主要来源于仪器本身性能和测量条件的选择两个方面。

1、复色光对比耳定律的偏离

 当检测溶液浓度较小且单色光较纯时,可近似认为符合比耳定律。但是精度再高的仪器,即使是双单色器的紫外可见分光光度计,也只能获得近乎单色的光,无法获得纯单色光,而复色光就会导致比耳定律的正或负偏离。

2、杂散光的影响(误差的主要来源)

杂散光是指进入检测器后处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分。

在定量分析时,一般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度,如果在分析波长处含有杂散光,这时样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,使测量吸光度低于真实吸光度。

3、仪器噪声对测量结果的影响

如果仪器噪声较大,会掩盖较小的测量信号,一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。

4、波长和吸光度准确度

样品的每一个值都是在一定的波长下测得的,如果波长误差很大,测出的值肯定不准。

5、参比溶液和溶剂的选择

正确选择合适的溶剂,对提高分析的准确度起重要作用。为减小溶剂中杂质的影响,应选择高纯度的溶剂;溶剂应不与待测物质发生化学反应;待测物在溶剂中要有一定的溶解度;在测定的波长范围内,溶剂本身没有吸收,注意常用溶剂的最短可用波长;当用挥发性大的溶剂时,测量过程中吸收池应加盖。

6、测试波长的选择

 在一般情况下,我们总是选择最大吸收波长作为测量波长,这样可以提高灵敏度。而在有些情况下最大吸收峰很尖锐、吸收过大或附近有干扰存在,就不能选最大吸收波长,而必须在保证有一定灵敏度的情况下,选择吸收曲线中的其它波长进行测定,以消除干扰。

7、吸光度范围的选择

试样在不同吸光度时,浓度的相对误差不同,一般选择0.2一0.8之间,浓度相对误差较小,可以通过改变吸收池厚度、检测波长或待测溶液浓度,使吸光度读数在适宜范围内。

8、狭缝宽度的选择

在定量分析时,为了得到足够的测量信号,应采用较大狭缝。在定性分析时,为了提高分辨率,应采用较小狭缝,以获得精细的光谱结构。

9、吸收池的选择和使用

 在定量测量之前需要对吸收池作校正和配对工作,吸收池不匹配时,对测量产生误差,吸收池方向不同,透光率亦有差异,测量结果就会有误差。如透光壁外有溶液存在,要擦干再测,否则将产生误差。

10、温度的选定

温度对溶液颜色的深浅和吸光度都有影响,温度升高,紫外可见分光光度计光谱吸收向短波方向移动。故在绘制标准曲线和测定样品时,应保持温度一致,通常在室温条件下进行。